В настоящее время признано, что щелевые контакты принимают участие в процессе развития при различных патологиях в центральной нервной системе: травмах головного мозга, ишемическом инсульте. Щелевые контакты образованы коннексинами – трансмембранными белками, которые в зависимости от их молекулярной массы подразделяют на несколько типов. В состав щелевых контактах между нейронами входит коннексин-36, а между астроцитами – коннексин-43. Кроме того, щелевые контакты также принимают участие в формировании гематоэнцефалического барьера (ГЭБ). Таким образом, состояние ГЭБ, а также регуляция мозгового кровотока, которая осуществляется на этом уровне, также является перспективной задачей. Таким образом, цель данного исследования состояла в анализе динамики изменения количества щелевых контактов, а также основных показателей микроциркуляции крови на разных сроках после ишемии. Работа была проведена на 16 крысах самцах линии Вистар (m=300-350г.). Животные были поделены на 2 группы: у контрольных животных моделировали ишемию разной степени тяжести с помощью метода фотохимического тромбирования, а экспериментальным животным через 1 час после моделирования ишемии внутривенно вводили карбеноксолон в дозе 1мг/кг. Работа включала несколько серий экспериментов. В первой серии анализировали распределение нейрональных и астроцитарных щелевых контактов (коннексин-36 и коннексин-43 соответственно) на разных сроках после ишемии мозга в очаге инсульта, а также в области пенумбры. В качестве контрольной области использовали интактную область неокортекса, удалённую на расстоянии свыше 2 мм от границы очага инсульта. Вторая серия экспериментов включала в себя эксперименты по измерению мозгового кровотока методом лазерной доплеровской флоуметрии на разных сроках после ишемии мозга в очаге инсульта, а также области пенумбры. В качестве контроля использовали фоновые записи, проведённые до ишемии. Данные иммуногистохимии показали, что через 1-3 суток после ишемии в области очага инсульта и пенумбре увеличено количество как Сх43, так и Сх36, в то время как на 8-е сутки после ишемии количество щелевых контактов в области очага инсульта и пенумбре снижено по сравнению с интактной областью коры. При этом у животных на фоне введения карбеноксолона количество щелевых контактов увеличено по сравнению с соответствующими областями у животных без введения карбеноксолона. Данные лазерной доплеровской флоуметрии показали, что в области очага инсульта резко снижается мозговой кровоток, и такая динамика сохраняется продолжительное время, в то время как в области пенумбры такие изменения носили кратковременный характер. Таким образом, данные экспериментов показали роль щелевых контактов при ишемии мозга. Исследование выполнено при поддержке Российской Академии Наук.
At present time it is recognized that gap junctions take part in the development of different pathological processes in the central nervous system (cerebral trauma, cerebral ischemia etc.). Gap junctions consist of the connexins – transmembrane proteins which are divided into several types. Connexin-36 is a neuronal and connexin-43 is a astocytic gap junctions. Furthermore, gap junctions also take part in the blood brain barrier (BBB) formation. Hence, BBB condition, regulation of cerebral microcirculation is a perspective aim. The aim of the present research was to analyze the dynamic in the number of gap junctions and main parameters of microcirculation in different times after cerebral ischemia. The investigation was carried out on 16 male Wistar rats (m=300-350g.). Animals were divided on two groups. In control rats cerebral ischemia was made by photochemical thrombosis. The experimental group of rats received carbenoxolone i.v. (1mg/kg). The research included two series of experiments. In the first part the distribution of the neuronal (Cx36) and astrocytic (Cx43) gap junctions was analyzed in the core, penumbra (1mm from the core boundary) and control area without imparements. The second part of the research included analyzing of cerebral microcirculation by laser Doppler flowmetry at different periods after cerebral ischemia in the core and penumbra. The baseline of microcirculation was recorded before cerebral microcirculation. The number of Cx43 and Cx36 was increased in the core and penumbra on the 1-3 days after cerebral ischemia. On the contrary, on the 8th day after ischemia the number of Cx43 and Cx36 was decreased compared to control area. After carbenoxolone treatment the number of Cx43 and Cx36 was increased control group in the appropriate areas. Laser Doppler flowmetry has shown that in the core the level of microcirculation is rapidly decreased, and such dynamic was observed for a long time. At the same time in the penumbra these changes were short-term. Thus, experimental data revealed the role of gap junctions during cerebral ischemia. The study was supported by the Russian Academy of Science.
|