Для идентификации генотипов кукурузы традиционно используется фермент эстераза, разделяемый в процессе электрофореза на геноспецифический спектр множества изоферментов. Рядом выдающихся исследователей создана номенклатура отдельных компонентов этого спектра, исходя из их подвижности или положению на электрофоретическом геле. Точкой отсчета при этом является повсеместно присутствующий во всех тканях кукурузы наиболее подвижный в щелочной буферной системе димерный изофермент Е8, кодируемый геном на коротком плече третьей хромосомы. Высокая его подвижность в этих условиях свидетельствует о том, что этот изофермент является кислым белком с большим количеством карбоксильных остатков. Значительно меньшее содержание боковых аминогрупп лизиновых оста- тков делает его устойчивым к инактивирующему ферментативную активность действию присутствующего в тканях кукурузы циклическогогидроксамата ДИМБОА путем алкилирования им свободных аминогрупп белков и ферментов. При этом на геле это видно как по значительному уменьшению интенсивности окраски линий изоферментов, так и по их некоторому размытию, вызванной вариацией подвижности, вследствие случайного изменения молекулярного веса изофермента в различной степени алкилирования его аминогрупп. Однако, вследствие малого содержания аминогрупп, Е8 эстераза почти не инактивируется, мало размывается и на геле видна резко и ярко. Исходя из теоретических положений учения охимических связей, автором этой публикации разработан способ разделения изоферментов эстеразы на топоизомеры. Квантово механическое рассмотрение сложноэфирной связи субстрата эстеразы показывает, что между карбонильным и эфирным кислородами возможен резонанс валентных связей и эти атомы расположеныкопланарно. В этой же плоскости создаетсяцис и транс расположение заместителей вдоль эфирной связи кислорода и углерода боковых заместителей кислотной и спиртовой составляющих молекулы сложного эфира. Эти цис и транс энантиомеры молекул сложных эфиров разлагаются соответствующими топоизомерными ферментами эстераз. Отсюда для идентификации топоизомеров использована смесь из a - и b - нафтилацетатов в качестве субстратов для инкубации гелей. Для этого вносилась уравновешенная по количеству мест азосочетаний смесь из них в пропорции 1:2, поскольку a - нафтол имеет 2 места сочетания с азокомпонентой, а b - нафтол только одно. В качестве копулирующей азокомпоненты использовалась соль прочного синего ББ. При этом зоны изоферментов на геле, имеющие наибольшее сродство к a - нафтил ацетату окрашивались в черный цвет, а зоны изоферментов, имеющие большее сродство к b - нафтил ацетату, окрашивались в красный цвет. Используя этот способ, появилась возможность разделить изоферменты эстеразы по сродству к различным субстратам на a и b - изоформы. При этом найдено, что Е8 является b - изоформой. Это дает дополнительный способ идентификации изоформ и аллелейэстераз на общем электрофоретическом спектре на геле. При проращивания семян кукурузы в течение 6 дней в растворе, содержащем 1 мг/мл N-этил-малеинимида, алкилирующего белки и ферменты по свободным SH группам, и последующего выделения фермента эстеразы и его электрофореза в щелочной буферной системе, найдено раздвоение одиночной полосы Е8 эстеразы на две полосы. Однако, при введении этого ингибитора в среду измельчения, на геле полоса Е8 не раздваивалась. Это свидетельствует о том, что после окончания трансляции, мономеры Е8 эстеразы некоторое время еще существуют со свободными SH группами, когда они доступны для алкилирования, а затем димеризуются в последующем процессинге путем образования между мономерами дисульфидной связи. Этим способом появилась возможность разделить Е8 эстераза на мономеры.