Целью работы было изучение действия противоопухолевых препаратов – эрбитукса и герцептина – на
функцию тромбоцитов, которая характеризуется двумя основными процессами: изменением формы клеток
и агрегацией. Эрбитукс и герцептин представляют собой лекарственные средства на основе
моноклональных антител (IgG1), направленные против рецептора эпидермального фактора роста (РЭФР).
Сигнальные пути РЭФР вовлечены в контроль выживания клетки, в регуляцию клеточного цикла,
ангиогенез, миграцию клеток и клеточную инвазию/процесс метастазирования. В исследованиях in vitro и in
vivo эрбитукс ингибирует пролиферацию и индуцирует апоптоз опухолевых клеток человека,
экспрессирующих РЭФР. In vitro эрбитукс ингибирует продукцию ангиогенных факторов в опухолевых
клетках и блокирует миграцию эндотелиальных клеток. In vivo эрбитукс ингибирует продукцию ангиогенных
факторов в опухолевых клетках и снижает активность ангиогенеза и метастазирования опухолей (Hendriks
D. et al., 2017; Furtado L.M. et al., 2017).
Регистрацию трансформации клеток при индукции различными агонистами осуществляли методом
малоуглового светорассеяния на лазерном анализаторе «Ласка-TМ». Одновременная регистрация
изменения интенсивности светорассеяния в различных углах (диапазон от 1 до 12 градусов) позволяет
выделять и исследовать этапы трансформации тромбоцитов: изменение формы, агрегации / дезагрегации и
образование фибринового тромба. Из крови здоровых доноров выделяли плазму, обогащенную
тромбоцитами (PRP – platelet rich plasma). Все эксперименты были сделаны в 1 мл модифицированной
HEPES среде (140mM NaCl, 10mM HEPES, 2mM KCl, 1mM MgCl2, 2 mM CaCl2, 5.5mM D-Glucose: pH 7.4,
осмолярность ~ 300 mOsm,). Конечная концентрация тромбоцитов в экспериментах составляла 2х107кл/мл.
Внесение индукторов проводилось после внесения плазмы, обогащенной тромбоцитами, в HEPES-среду.
Было показано, что эрбитукс и герцептин, также как и ранее исследованные нами препараты
(доцетаксел и паклитаксел), подавляют индуцированную агрегацию тромбоцитов, не ингибируя начальную
фазу их активации – изменение формы клеток. Эти эффекты проявляются в терапевтическом диапазоне
действия препаратов. Эрбитукс в значительно большей степени ингибирует тромбоксан (U46619) -
индуцированную агрегацию (IC50~0.3-1мг/мл), чем агрегацию, вызванную ADP (IC50~3-8 мг/мл).
Таким образом, при применении данных препаратов для химиотерапии необходимо учитывать
эффект подавления агрегационной активности тромбоцитов.
Работа выполнена в при поддержке РФФИ (проект № 17-00-00141 (17-00-00139)) и в рамках
государственного задания ФАНО России (тема № АААА-А18-118012290371-3).

The aim of the work was to study the action of antitumor drugs – erbitux and herceptin – on the function of
platelets, which is characterized by two main processes: change in the shape of the cells (shape change) and
aggregation. Erbitux and herceptin are drugs based on monoclonal antibodies (IgG1) directed against the
epidermal growth factor receptor (EGFR). The EGFR signaling pathways are involved in the control of cell survival,
in the regulation of the cell cycle, angiogenesis, cell migration and cellular invasion / metastasis process. In in vitro
and in vivo studies, erbitux inhibits proliferation and induces apoptosis of human tumor cells expressing EGFR. In
vitro erbitux inhibits the production of angiogenic factors in tumor cells and blocks the migration of endothelial cells.
In vivo erbitux inhibits the production of angiogenic factors in tumor cells and reduces the activity of tumor
angiogenesis and metastasis (Hendriks D. et al., 2017; Furtado L.M. et al., 2017).
Registration of transformation of cells by induction with various agonists was performed by the method of
small-angle light scattering on the Laska-TM laser analyzer. Simultaneous recording of changes in the intensity of
light scattering at various angles (range from 1 to 12 degrees) makes it possible to isolate and investigate the
stages of platelet transformation: change in form, aggregation / disaggregation, and formation of fibrin clot. Plasma
enriched with platelets – PRP (platelet reach plasma) was isolated from the blood of healthy donors. All
experiments were done on PRP in 1 ml of HEPES modified medium (140mM NaCl, 10mM HEPES, 2mM KCl, 1mM
MgCl2, 2mM CaCl2, 5.5mM D-Glucose: pH 7.4, osmolarity ~ 300 mOsm,). The final concentration of platelets in
the experiments was 2 х 107 pl/ ml. Inductors were made after application of PRP into the HEPES medium.
It was shown that erbitux and herceptin, as well as the previously studied drugs (docetaxel and paclitaxel),
suppress the induced platelet aggregation, without inhibiting the initial phase of their activation – the change in the
shape of the cells. These effects are manifested in the therapeutic range of action of the drugs. Erbitux significantly
inhibits thromboxane (U46619) -induced aggregation (IC50 ~ 0.3-1mg / ml) than ADP-mediated aggregation (IC50
~ 3-8 mg / ml).
Thus, when using these drugs for chemotherapy, it is necessary to take into account the effect of
suppressing the aggregation activity of platelets.
The work is done in support of RFBR (project N 17-00-00141 (17-00-00139)) and in the framework of the
State assignment of FANO Russia (theme N АААА-А18-118012290371-3).