Introducere. Zona Umedă Construită (ZUC) Orhei, la moment,prezintă cel mai mare sistem complex din Europa detratare a apelor reziduale. ZUC Orhei deservește aproximativ26000 de locuitori, câteva instituții economice, publice,inclusiv medico-sanitare. Mărimea și capacitatea ZUC Orhei,necesită un management particular, în evaluarea calitățiitratării apelor reziduale din punct de vedere microbiologic.Scopul lucrării constă în prezentarea metodologiei prelevăriiși pregătirii probelor de ape reziduale pentru analizemoleculare în vederea eficientizării procesului de tratare aapelor reziduale din ZUC, ca strategie de intervenție pentrua preveni diseminarea rezistenței la antibiotice (RAM) înapele de suprafață. Material și metode. Lucrarea se bazeazăpe protocolul de prelevare a apelor reziduale, elaborat încadrul proiectului PhageLand. Au fost descrise modalitateade prelevare și manipulare a probelor pentru analize moleculare(metagenomică). Rezultate. Punctele de colectare aprobelor au fost selectate urmând procesul tehnologic: apăreziduală brută; 4 puncte de pe liniile platformei de stuf filtrant(RBF); 4 puncte de pe liniile platformei cu flux vertical(VF) și produsul final. Probele au fost colectate folosindsticle sterile din borosilicat de 1l. Odată ajunse în laborator,un volum de apă (250ml pentru efluenți și 50ml pentru apăreziduală brută) a fost filtrat prin membrane cu ∅ porilorde 0,2 μm folosind un dispozitiv de filtrare la vid (3 filtre/probă). Filtrele au fost introduse în tuburi Eppendorf sterilede 2 ml și depozitate la (–20ºC) până la livrarea cătreUniversitatea din Varșovia pentru extracția ADN și analizametagenomică. Concluzii. Metodologia prezentată a permisrealizarea unei caracterizări a comunităților bacteriene, resistomuluicu scopul eficientizării procesului de tratare aapelor reziduale din ZUC Orhei.

Background. The Orhei Constructed Wetland (CW), now,presents the largest complex system in Europe for wastewatertreatment. Orhei CW serves about 26,000 inhabitants,several economic, and public institutions, including medicaland sanitary ones. The size and capacity of Orhei CW requireparticular management, in assessing the quality of wastewatertreatment, especially from a microbiological pointof view. Objective of the study is to present the methodologyof sampling and preparation of wastewater samples formolecular analysis in order to streamline the wastewatertreatment process in the CW, as an intervention strategy toprevent the spread of antibiotic resistance (ARM) in surfacewaters. Material and methods. This paper is based onthe wastewater sampling protocol, developed within PhageLandproject. The method of sampling and handling ofsamples for molecular analysis (metagenomics) has beendescribed. Results. The collecting points of wastewatersamples were selected based on the technological process,as follows: raw wastewater; 4 points from the lines of thefilter reed platform (RBF); 4 points from the lines of the verticalflow platform (VF) and the final product. Samples werecollected using sterile borosilicate bottles of 1L. Once in thelaboratory, a known volume of water (250ml for effluentsand 50ml for raw wastewater) was filtered through membraneswith a pore ∅ of 0.2 μm using a vacuum filter device(3 filters/sample). The filters were inserted into sterile 2 mlEppendorf tubes and stored at (– 20℃) until delivery to theUniversity of Warsaw for DNA extraction and metagenomicanalysis. Conclusion. The presented methodology allowedus to carry out a characterization of bacterial communitiesand resistome to streamline the wastewater treatmentprocess in Orhei CW.