Introducere. Actualmente obţinerea hepatocitelor este o premisă în crearea condiţiilor necesare de cercetare în domeniul medical, aceasta fiind un instrument important în dezvoltarea de noi strategii în domeniul ingineriei tisulare, ce presupune obţinerea de organe funcţionale în condiţii de laborator. Scopul lucrării. Izolarea hepatocitelor din ficat de şobolan adult necesare pentru studierea procesului de recelularizare a ficatului in vitro. Material şi metode. Studiu a fost efectuat pe ficate de şobolan adult Wistar cu masa corporală de 274,66 ± 2,52 g (n=3) din care au fost extrase hepatocitele prin perfuzarea prin vena cavă superioară cu colagenază de tip II şi Hank’s cu 0,9 mM MgCl2, 0,5 mM EDTA şi 25 mM HEPES (HiMedia, India). Rezultate.Celulele au fost numărate la 1, 3 şi a 5-a zi cu tripan albastru 0,25% în hemocitometru, determinată viabilitatea şi au fost cultivate în mediu William E (HiMedia, India) cu 2 mM L-glutamină, 5% ser fetal bovin (Lonza, Belgia), soluţie antibiotic antimicotic (HiMedia, India), 100 nM dezametazonă şi 100 nM insulină, a cîte 2,5 x 105 celule per godeu în plăci cu 12 godeuri. În urma izolării hepatocitelor au fost obţinute 324,48 x 106 ± 1,25, celule cu o viabilitate de 94,7 ± 0,9, % ceea ce denotă un randament înalt de celule viabile. Concluzii. Metoda de izolare a hepatocitelor este una eficientă şi necesită studii ulterioare pentru recelularizarea in vitro a ficatului.

Introduction. Currently hepatocytes obtaining is a prerequisite to create the necessary conditions for medical research, because it is an important tool in developing of new strategies in tissue engineering domain, which represent achievement of functional organs in laboratory conditions. Objective of the study. Isolation of hepatocytes from adult rat liver that are necessary for studying in vitro liver recelullarization. Material and methods. The study was made on adult Wistar rat liver with body weight 274.66 ± 2.52 g (n=3) which were used for hepatocytes extraction by perfusion through the superior vena cava with collagenase type II and Hank's 0.9 mM MgCl2, 0.5 mM EDTA and 25 mM HEPES (HiMedia, India). Results. The cells were counted at the 1, 3 and 5 days with trypan blue 0.25% in hemocytometer and cultured in William's E medium (HiMedia, India) with 2 mM L-glutamine, 5% fetal bovine serum (Lonza, Belgium), antibiotic antimycotic solution (HiMedia, India), 100 nM dexamethasone and 100 nM insulin, with 2.5 x 105 cells per well in 12-well plates. After isolation were obtained 324.48 ± 1.25 x 106 hepatocytes, with a viability of 94.7 ± 0.9 % which indicates a high yield of cells viability. Conclusions. Hepatocyte isolation method is efficient and need further study for in vitro liver recellularisation.