La nivelul punctelor de control ale ciclului celular, un rol important îl au ciclinele, interacțiunea acestora cu kinazele specifice permițând avansarea celulei de la o etapă la alta a ciclului celular. Gena CDK2 este localizată pe cromozomul 12 la Homo sapiens și formată dintr-un complex de cicline A şi E, subunităţi reglatoare, esenţiale în tranziţia G1/S şi replicarea ADN. Principala cauză a apariției cancerului o reprezintă alterarea structurală sau funcțională a genelor implicate în controlul proliferării și diferențierii celulare. Implicit supraexpresia genei CDK2 a fost observată în carcinoame pulmonare, gastrice și colorectale, leucemii limfocitare cronice și mifoblastice, cancere ale aparatului genital, sarcoame ale țesuturilor moi și osteosarcoame. Studii recente prezintă legătura dintre activitatea ciclinei A în progresarea sau blocarea ciclului celular cu implicațiile în declanșarea proceselor apoptotice. Tratamentul cu plasmă rece presupune generarea în concentrații mari a speciilor reactive de oxigen, prezentând puternice proprietăți oxidative, cu implicații în declanșarea unor căi de semnalizare celulară. Astfel, există premisele ca interacțiunea dintre speciile reactive și celule să poată fi utilizată în terapia cancerului. A fost observat că plasma rece determină stoparea creșterii celulare, apoptoza și necroza și prezintă specificitate de acțiune în celulele tumorale, comparativ cu cele normale. Pentru evidențierea efectelor apoptotice ale plasmei asupra celulelor tumorale, am utilizat culturi celulare aparținând liniilor HOS (ATCC® CRL1543 ™) de osteosarcom și celule normale HMLE, care au fost tratate cu plasmă rece, timp de 30, 60, 120 și 180 sec. Evaluarea expresiei genei s-a realizat la 2, respectiv 24 de ore după tratament. Izolarea ARN a fost urmată de o determinare spectrofotometrică a concentrației și integrității, iar pe baza valorilor concentrațiilor (ng/μl), a fost realizată normalizarea.Cuantificarea expresiei genei CDK2, reverstranscripția și amplificarea prin PCR cantitativ în timp real (RT-qPCR), a fost efectuată într-o reacție de amplificare single-step, GoTaq® 1-Step RT-qPCR System (Promega), într-un volum de reacție de 20 μl. Integritatea produșilor PCR a fost verificată prin electroforeză pe gel de agaroză. Gena CDK2 este supraexprimată în celulele tumorale de osteosarcom (HOS) în urma tratamentului cu plasmă rece, comparativ cu celulele normale (HMLE), ceea ce indică o activitate oxidativă accentuată la nivel intracelular și o capacitate scăzută de contracarare a efectelor în cazul celulelor tumorale (Fig.).figuraFig. Expresia genei CDK2 în linii celulare de osteosarcom (HOS) și normale (HMLE)