Introducere. Prelevarea și transportarea sângelui capilarîn formă de spoturi uscate (DBS) este mai comod comparativcu sângele venos. Totodată, nivelurile multor metaboliți,analizați în DBS, diferă de cele plasmatice și necesită recalcularealor după valorile hematocritului (Hct). Ultimul nupoate fi măsurat direct în DBS, dar poate fi apreciat dupănivelul de hemoglobină (Hb). Una din cele mai simplemetode de măsurare a Hb, bazată pe transformarea ei în clorhidratde hematină, este aplicabilă pentru sânge lichid, darîn cazul DBS se reduce extracția hematinei. Scopul lucrării.Crearea unei metode optimizate, care va asigura extracțiacompletă a hematinei din DBS, totodată va permite determinareași altor metaboliți în același disc, decupat din DBS.Material și metode. Spectrofotometru Lambda 25 (PerkinElmer), reactivi și solvenți (Sigma-Aldrich). Probele modelcu diferite valori de Hct au fost preparate din sânge de ladonatori. Discurile din DBS, intacte sau după extracția aminoacizilorcu metanol-apă (2:1) sau acid percloric 3%, s-autratat cu acid formic (metoda propusă) sau acid clorhidric0.02 M (metoda de referință) cu agitare timp de 60 min.Hematina s-a măsurat în extracte după absorbanța opticăla 520 nm. Rezultate. La utilizarea acidului formic plenitudineaextracției hematinei a atins valorile 92.9±1.0% dinDBS intacte, 97.9±0.3% după extracția cu metanol apos și96.5±0.5% după extracția cu acid percloric. La aplicareametodei de referință aceste valori au constituit respectiv76.1±0.8%, 74.4±1.4% și 49.2±2.1%. Răspunsul analiticpentru metoda propusă este linear în diapazonul Hct dela 0.19 până la 0.65. Concluzii. S-a elaborat o metodă simplă,ce permite aprecierea sigură a nivelului de Hct în DBS,inclusiv după extragerea altor metaboliți analitici.

Background. Collecting and transporting capillary bloodin the form of dried spots (DBS), is more convenient comparedto venous blood. At the same time, the levels of manymetabolites, analyzed in DBS, differ from the plasma levels,and require their recalculation according to the hematocrit(Hct) values. The latter cannot be measured directly in DBSbut can be estimated from the hemoglobin (Hb) level. One ofthe simplest methods of measuring Hb, based on its conversionto hematin hydrochloride, is applicable for liquid bloodbut leads to reduced extraction of hematin in case of DBS.Objective of the study. Creation of an optimized method,which will ensure the complete extraction of hematin fromDBS and will allow the determination of other metabolitesin the same disc, cut from DBS. Material and methods.Lambda 25 spectrophotometer (Perkin Elmer), reagents,and solvents (Sigma-Aldrich). Model samples with differentHct values were prepared from donated blood. DBS discs, intactor after extraction of amino acids with methanol-water(2:1) or 3% perchloric acid, were treated with formic acid(proposed method) or 0.02 M hydrochloric acid (referencemethod) with stirring for 60 min. Hematin was measuredin extracts by optical absorbance at 520 nm. Results. Whenusing formic acid, the completeness of hematin extractionreached values of 92.9±1.0% from intact DBS, 97.9±0.3%after extraction with aqueous methanol and 96.5±0.5% afterextraction with perchloric acid. When applying the referencemethod, these values were respectively 76.1±0.8%,74.4±1.4% and 49.2±2.1%. The analytical response for theproposed method is linear in the Hct range from 0.19 to0.65. Conclusions. A simple method was developed, whichallows the certain estimation of the Hct level in DBS, includingafter the extraction of other analytical metabolites.